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液相色譜儀的組成與點(diǎn)
點(diǎn)擊次數(shù)：2262 更新時(shí)間：2018-03-21
液相色譜儀的組成與點(diǎn)
液相色譜儀主要有進(jìn)樣系統(tǒng)、輸液系統(tǒng)、分離系統(tǒng)、系統(tǒng)和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)，下面將分別敘述其各自的組成與點(diǎn)。
1.進(jìn)樣系統(tǒng)一般采用隔膜注進(jìn)樣器或高壓進(jìn)樣間完成進(jìn)樣操作，進(jìn)樣量是恒定的。這對(duì)分析樣品的重復(fù)性是有益的。
2.輸液系統(tǒng)該系統(tǒng)包括高壓泵、流動(dòng)相貯存器和梯度儀三部分。高壓泵的一般壓為l.47～4.4X107Pa，流速調(diào)且穩(wěn)定，當(dāng)高壓流動(dòng)相通過層析柱時(shí)，樣品在柱中的擴(kuò)散效應(yīng)，加快其在柱中的移動(dòng)速度，這對(duì)分辨率、回收樣品、保持樣品的生物活性等是有利的。流動(dòng)相貯存錯(cuò)和梯度儀，使流動(dòng)相隨固定相和樣品的性質(zhì)而改變，包括改變洗脫液的極性、離子度、PH值，或改用競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑或變性劑等。這就使各種物質(zhì)(即使有一個(gè)基團(tuán)的差別或是同分異構(gòu)體)能獲得分離。
3.分離系統(tǒng)該系統(tǒng)包括色譜柱、連接管和恒溫器等。色譜柱一般長(zhǎng)度為10～50cm(需要兩根連用時(shí)，在二者之間加一連接管)，內(nèi)徑為2～5mm，由"不銹鋼或厚壁玻璃管或鈦合金等材料制成，住內(nèi)裝有直徑為5～10μm粒度的固定相(由基質(zhì)和固定液構(gòu)成).固定相中的基質(zhì)是由機(jī)械度高的樹脂或硅膠構(gòu)成，它們有惰性(如硅膠表面的硅酸基因基本已除去)、多孔性(孔徑1000?)和比表面積大的點(diǎn)，加之其表面經(jīng)過機(jī)械涂漬(與氣相色譜中固定相的制備一樣)，或者用化學(xué)法偶聯(lián)各種基因(如磷酸基、季胺基、羥甲基、苯基、氨基或各種長(zhǎng)度碳鏈的烷基等)或配體的化合物。因此，這類固定相對(duì)結(jié)構(gòu)不同的物質(zhì)有良好的選擇性。例如，在多孔性硅膠表面偶聯(lián)豌豆凝集素(PSA)后，就以把成纖維細(xì)胞中的一種糖蛋白分離出來。
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