液相色譜儀藥、生化、環(huán)境行業(yè)跨入新高度
點擊次數(shù):1597 更新時間:2019-10-16
如今,液相色譜儀在藥方面、生物方面、化工方面、環(huán)境方面應(yīng)用頗為,色譜是一種分離分析手段,分離是核心,因此擔(dān)負分離作用的色譜柱是色譜系統(tǒng)的心臟。液相色譜儀根據(jù)固定相是液體或是固體,又分為液-液色譜(LLC)及液-固色譜(LSC)?,F(xiàn)代液相色譜儀由高壓輸液泵、進樣系統(tǒng)、溫度控制系統(tǒng)、色譜柱、器、信號記錄系統(tǒng)等部分組成。與液相柱色譜裝置比較,具有、、靈敏等點。對高沸點、難氣化合物的混合物通過色譜柱核淋洗劑并以實現(xiàn)分離。
液相色譜系統(tǒng)由儲液器、泵、進樣器、色譜柱、器、記錄儀等幾部分組成。儲液器中的流動相被高壓泵打入系統(tǒng),樣品溶液經(jīng)進樣器進入流動相,被流動相載入色譜柱(固定相)內(nèi),由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù),在兩相中作相對運動時,經(jīng)過反復(fù)多次的吸附-解吸的分配過程,各組分在移動速度上產(chǎn)生較大的差別,被分離成單個組分依次從柱內(nèi)流出,通過器時,樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號傳送到記錄儀,數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來液相色譜儀主要有進樣系統(tǒng)、輸液系統(tǒng)、分離系統(tǒng)、系統(tǒng)和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)。
1、輸液系統(tǒng):該系統(tǒng)包括高壓泵、流動相貯存器和梯度儀三部分。高壓泵的一般壓為l.47~4.4X10Pa,流速調(diào)且穩(wěn)定,當(dāng)高壓流動相通過層析柱時,樣品在柱中的擴散效應(yīng),加快其在柱中的移動速度,這對分辨率、回收樣品、保持樣品的生物活性等是有利的。流動相貯存器和梯度儀,使流動相隨固定相和樣品的性質(zhì)而改變,包括改變洗脫液的極性、離子度、PH值,或改用競爭性抑制劑或變性劑等。這就使各種物質(zhì)能獲得分離。
2、進樣系統(tǒng):液相色譜系統(tǒng)一般采用隔膜注進樣器或高壓進樣間完成進樣操作,進樣量是恒定的。這對分析樣品的重復(fù)性是有益的。
3、分離系統(tǒng):該系統(tǒng)包括色譜柱、連接管和恒溫器等。色譜柱一般長度為10~50cm,內(nèi)徑為2~5mm,由"不銹鋼或厚壁玻璃管或鈦合金等材料制成,住內(nèi)裝有直徑為5~10μm粒度的固定相。固定相中的基質(zhì)是由機械度高的樹脂或硅膠構(gòu)成,它們有惰性、多孔性和比表面積大的點,加之其表面經(jīng)過機械涂漬,或者用化學(xué)法偶聯(lián)各種基因或配體的化合物。